Ciklikus peptid szintézis - Tudományos peptid

Ciklikus peptid szintézis|Egyedi ciklikus peptidek|Tűzött peptidek|Oldallánc ciklizálás|Tudomány-Peptid

Meta leírás

Nehéz ciklikus peptidekre van szüksége? Science-A peptid ciklikus peptidszintézis szolgáltatása kiterjed az első és utolsó ciklizálásra, az oldallánc ciklizálására, a kapcsos peptidekre, a többszörös diszulfidkötés-párosításra. 20 éves tapasztalat a komplex ciklikus peptidek terén, a stabil szállítás. Kérjük, forduljon hozzánk bizalommal.

Ciklikus peptid: a lineáris peptid továbbfejlesztett változata

Miért a ciklikus peptidek?
Aki dolgozott már peptidekkel, tudja, hogy a lineáris peptidek jól működnek, de néha nem működnek olyan jól - az enzimek a szervezetbe jutásuk után rövid időn belül lehasítják őket, vagy nem kötődnek elég szorosan a célhelyhez. E problémák megoldásának legközvetlenebb módja a lineáris peptidek hurokká alakítása.

A ciklikus peptidek fixebb konformációval rendelkeznek, és nem könnyen hasíthatók proteázokkal; a céllal kombinálva, mivel a szerkezet zárva van, az entrópia vesztesége kicsi, és a kötőerő erősebb. Számos természetes aktív peptid ciklikus természetű, mint például az antibakteriális peptidek és az immunszuppresszánsok, amelyek esetében az evolúció régóta választotta számunkra az irányt.

A ciklikus peptidszintézis nehézsége azonban valóban sokkal magasabb, mint a lineáris peptideké. Korábban már ráléptünk ezekre a kátyúkra, és tudjuk, hogyan lehet kikerülni őket, például a gyűrűképzés alacsony hatékonysága, számos mellékreakció és a tisztítás lehetetlensége.

Mit tehetünk a csengetés ellen?

1. Circularizáció: attól függően, hogy mit akar

A kerékpározás típusa	Hogyan kell	Mikor kell használni
Első és utolsó gyűrűzés	Az N-end és a C-end közvetlenül kapcsolódik	A természetes ciklikus peptideket utánozva általában rövid peptideket használnak
oldalsó-láncciklizálás	ciklizáció Lys, Glu és Asp oldalláncokon keresztül	A végét a vágásra szeretné hagyni, vagy nagyobb a gyűrű
diszulfid kötés ciklizálása	Diszulfid kötés kialakulása Cys között	Antimikrobiális peptidek, toxin peptidek, a legtöbb természetben előforduló
Tűzött peptidek	A szénhidrogénlánc rögzíti a hélixet	Az alfa{0}}hélix stabilizálása és a membrán behatolásának fokozása
Kén-éter ciklizálása	Nem-természetes kötés, jobban ellenáll az enzimes lebomlásnak	Ahhoz, hogy gyógyszert készítsenek, magas metabolikus stabilitás szükséges

A célszerkezettől függően meghatározzuk, hogy melyik ciklizálás a legmegfelelőbb. A ciklikus peptid szintézis első lépése a megfelelő ciklizálási módszer kiválasztása.

2. Diszulfid kötések: 1-4 pár készült
Egypáros diszulfidkötés: rutinszerű működés, 95% feletti sikerarány.
Két pár diszulfid kötés: szabályozni kell a párosítás sorrendjét, ortogonális védelmi stratégiánk van.
Három vagy több pár: Legfeljebb négy pár, egyenként kinyitva és összeillesztve.

3. Hossza: 2-60 aminosav ciklizálás után
Minél hosszabb a ciklikus peptid, annál jobb, annál hosszabb ideig csökken a ciklizálási hatékonyság. A valaha készített leghosszabb ciklikus peptid 60 aminosavból áll, és a lineáris fragmentumot először szegmensekben szintetizáltuk, majd folyadékfázisban ciklizáltuk.

4. Tisztaság: a kísérleti szakasztól függően

Tisztasági szint	Megfelelő forgatókönyvek
nyers (70-85%)	Kezdeti szűrés, először ellenőrizze, hogy aktív-e, pénzt takaríthat meg
Hagyományos tiszta (85-95%)	Sejtkísérletek, kombinálva olyan kísérletekkel, amelyek
Nagy tisztaságú (95-98%)	Állatkísérletek, funkcionális validáció
Ultrapure (>98%)	Kristályszerkezet, NMR

Minden ciklikus peptidet HPLC és MS jelentések kísérnek, és a ciklizációs hatékonyság, a maradék lineáris peptid és a tisztaság egyértelműen meg van jelölve.

5. A gyűrű is módosítható
Fluoreszcens jelölés: FITC, TAMRA, Cy5, szeretné látni, hová megy a ciklikus peptid.
Biotin: Húzza le-vagy tesztelje.
PEGiláció: Az in vivo felezési{0}}meghosszabbítás.
D- típusú aminosavak: javítja a stabilitást.

Miért keressen minket ciklikus peptidszintézisért?

1. 20 éve végezzük ezt a munkát
A ciklikus peptidszintézis nem csupán abból áll, hogy egy lineáris peptidet egy reakciófiolába kell dobni, és fel kell keverni. Ha a ciklizálás körülményei kissé rosszak, akkor vagy olyan alacsony lesz a hozam, hogy kétségbe vonja az életét, vagy sok lesz a melléktermék, amelyet nem lehet szétválasztani.

Transzmembrán peptidek ciklizálása, konotoxin három pár diszulfidkötéssel, kapcsos helikális peptidek - sok nehéz ciklizációs peptidet kezeltünk az évek során. Jó elképzelésünk van arról, hogy mely szekvenciák könnyen polimerizálhatók, és milyen körülmények menthetik meg őket. Ha jössz hozzánk ciklikus peptidszintézisre, legalább nem kell az elejétől a gödörbe lépned.

2. Cikluszási stratégiák: szilárd fázis vagy folyékony fázis, a választás az Öné
Szilárd-fázisú ciklizálás: közvetlen gyűrűképzés a gyantán, alkalmas rövid peptidek és oldalláncok ciklizálására, könnyen kezelhető, alkalmas nagy áteresztőképességre.
Folyékony fázisú gyűrűzárás: lineáris peptidek tisztítása, majd ciklizálás, alkalmas hosszú peptidekhez, vagy ha híg körülményekre van szükség a polimerizáció elkerülése érdekében.
Két-lépéses módszer: lineáris peptid szilárd-fázisú szintézise, tisztítás, majd folyékony-fázisú ciklizálás a tisztaság és a hozam egyensúlya érdekében.
Nincs mindenki számára megfelelő-méretű-megközelítés. A sorrend és a kerékpározási módszer alapján kiválasztjuk a legmegbízhatóbb útvonalat.

3. Diszulfidkötés illesztés: nincs találgatás, nincs stratégia
A legnehezebb dolog több diszulfidkötéspár esetén a párosítási sorrend. Van egy ortogonális védelmi stratégiánk, amely egyesével nyithatja és párosítja őket, így biztosítva, hogy a diszulfid kötések a megfelelő helyen kapcsolódjanak.

4. Minőségellenőrzés: minden ciklikus peptid dokumentálva van
MS: Először nézze meg, hogy a molekulatömeg helyes-e (a gyűrűképzés módjától függően 18-cal vagy többel kisebb, mint a lineáris a gyűrűzárás után).
HPLC: nézd meg a tisztaságot, és azt is, hogy hány lineáris peptid nincs hurkolva.
Választható: peptidtartalom, endotoxin, nedvesség.
A ciklikus peptidszintézis során az adatok magukért beszélnek, hamisságok nélkül.

5. Kis mennyiségtől nagy mennyiségig, beszállítóváltás nélkül
Milligramm a szűrési fázisban, tíz milligramm a validálási fázisban, száz milligramm-gramm a preklinikai fázisban - mindezt meg tudjuk csinálni. Ugyanaz a projekt, ugyanaz a megfelelő, nem kell újra-harmonizálni.

Mire használhatók a ciklikus peptidek?

Kutatási irányok	Gyakori felhasználások	Ciklikus megközelítés
Antimikrobiális peptidek	Jobb stabilitás, kevésbé érzékeny az enzimatikus hasításra	diszulfidkötés ciklizálása, fej{0}}--ciklizáció
Daganatellenes peptidek	Továbbfejlesztett kötődés a célhoz	tűzött peptidek, oldallánc ciklizáció
immunszuppresszió	ciklosporin analógok	Első és utolsó gyűrűzés
sejtbehatoló peptidek-	A sejtek bejutásának képességének javítása, amelyek	Tűzött peptidek
toxinkutatás	Konotoxin, kígyóméreg peptidek	Több pár diszulfid kötés
peptid hormonok	meghosszabbodott{0}}felezési idő	oldalsó-láncciklizálás
diagnosztikai reagensek	Gyűrűs szonda, jó specifikáció	biotinnal vagy fluoreszcens markerekkel jelölhetők

Szállítás és minőségellenőrzés

Szállítás: Liofilizált por, centrifugacsövek vagy fiolák, nitrogénnel védett.
Kísérő dokumentumok: COA (HPLC profil + MS spektrum), MS/MS (a ciklizációs hely/diszulfid kötés párosításának megerősítésére).
Választható vizsgálatok: peptidtartalom, endotoxin, nedvesség, aminosav összetétel.
Személyre szabott csomagolás: adagolás és jelölés az Ön igényei szerint.
Minden ciklikus peptid szintézis terméket kétszer{0}}ellenőrzünk a megfelelő ciklizálás és tisztaság biztosítása érdekében a szállítás előtt.

Három igaz történet

1. eset: Egy kutatóintézet antimikrobiális peptid programja

The client wanted a cyclic peptide containing two pairs of disulfide bonds, 28 amino acids, of natural origin. We designed an orthogonal protection strategy, forming the first pair first, then oxidizing to form the second pair. Finally, the purity of the cyclic peptide is >95%, a diszulfid kötések megfelelően párosulnak, és az aktivitás igazolt.

2. eset: Egy multinacionális gyógyszergyártó cég tűzött peptid projektje

The customer wanted a stapled peptide with stabilized α-helix and 22 amino acids. We introduced olefinic amino acids into the solid-phase synthesis and completed the ring closure on the resin. The purity was >90%-kal, a hélix pedig 40%-kal volt magasabb, mint a lineáris peptideké, és a peptidet sikeresen bevezették állatkísérletekbe.

3. eset: Toxinkutatás egy nemzeti egyetemen

Az ügyfél három pár diszulfid kötést tartalmazó Conotoxint akart készíteni, és több céget is felkért ennek elkészítésére. Újraterveztük a védelmi stratégiát, három lépésben megnyitottuk és párosítottuk a diszulfidkötéseket, és megerősítettük a helyes párosítást az MS/MS által. Miután az ügyfél megkapta a peptidet, megoldottuk a szerkezetet és megjelentettük a cikket.

Ciklikus peptidszükségleteiről beszél?

Akár nehéz ciklikus peptidet szeretne kritikus kísérletekhez, akár egy lineáris peptidet szeretne ciklizálni a gyógyszerelhetőség javítása érdekében, beszéljen velünk. Ha Science{1}}peptidet keres a ciklikus peptidszintézishez, legalább nem kell a kezdetektől a gödörbe lépnie.

El kell mondanom:

Peptidszekvenciák (vagy lineáris szekvenciák)
Hogyan szeretne ciklizálni (első és utolsó / oldallánc / diszulfid kötés / tűzött peptid)
Mennyit kell kérni (mg/g)
tisztasági követelmények

Mikor akarod?

24 órán belül megvalósíthatósági értékelést és árajánlatot ad.