Szemaglutid szennyeződések

Szemaglutid szennyeződések|Szimeglutid szennyeződéskontroll|Szennyeződés egyedi szintézis és szerkezet megerősítése|Tudomány-Peptid

Soma Lutide (Simeglutide) szennyeződés-ellenőrzés - GLP-hez-1 gyógyszerminőségi vizsgálat, általános gyógyszerbenyújtás.Science-A peptid a Soma Lutiddal kapcsolatos szennyeződések egyedi szintézisét biztosítja, beleértve a hiányzó peptideket, oxidált szennyeződéseket, zsírsav-hámlasztó termékeket, PEG-lánchoz kapcsolódó szerkezeti adatokat, stb. Támogathatjuk a szennyeződési profil kutatását. Üdvözöljük, lépjen velünk kapcsolatba.

A szemaglutid (más néven Semaglutide) ezekben az években lángokban állt. A Novo Nordisk arra támaszkodik, hogy a piaci értéket a világ második, hazai peptidgenerikum-gyártói felé tolja, szinte nem bámulja. Az orális adagolási forma és az injekciós adagolási forma mind nagy piacok. A szabadalom lejárta után ki végezheti először a minőségi kutatást, kinek lesz lehetősége az első generikum megragadására.

 

A szomatosztatin minőségi vizsgálata azonban őszintén szólva nehezebb, mint sok peptidé. Ez egy 31- peptid zsírsavlánccal (oktadekándisav) és PEG linkerrel. Ez a szerkezet határozza meg, hogy szennyeződési spektruma különösen gazdag - hiányzó peptidek, oxidált szennyeződések, zsírsav-leválasztó termékek, PEG-lánchoz kapcsolódó szennyeződések, a dimerek mindegyikének kontrollálnia kell, mindegyiknek tisztának kell lennie. Különösen a PEG-lánc, amely nem található meg a közönséges peptidekben, egyedülálló a Somalutide számára.

 

Nagy tapasztalattal rendelkezünk komplex peptid szennyeződések szintézisében. A szomatosztatin vizsgálatára szakosodtunk, és tudjuk, hogy milyen nehézségeket okoz a szennyeződési profilja, és melyek a lényeges kontrollelemek. A különböző Semaglutide Inpurities kontrollok szintézisét az Ön igényei szerint testre szabhatjuk szerkezeti visszaigazolási adatokkal, és segítünk a módszer kialakításában, így kisebb valószínűséggel kaphat kiegészítést a bejelentéskor.

A szomatosztatin molekuláris szerkezete meghatározza, hogy szennyeződési profilja sokkal összetettebb, mint a közönséges peptideké. Amikor szennyeződésvizsgálatokat végzünk, elsősorban az alábbi kategóriákra koncentrálunk:

Hiányzó peptid
A 31 aminosav, amelyek közül bármelyik kimarad a szintézis során, szennyeződés. A hiányzó peptidek retenciós ideje HPLC-n széles körben eloszlott, a hiányzó peptidek eltérő polaritással a különböző pozíciókban. Némelyik hiányzik az N-végről, néhány a közepén, néhány pedig a zsírsav-csatlakozási hely közelében. Megrendelést kaptunk egy vásárlótól, aki egy tucatnyi hiányzó peptidet kért különböző pozíciókban, hogy megtalálja az összes lehetséges hiányzó szennyeződést a folyamat során.

Oxidáló szennyeződések
A Somalutide szekvenciájában metionin (Met) található, amely érzékeny szulfoxiddá, majd szulfonná oxidálódva. Az oxidált szennyeződések gyakran megjelennek a stabilitási vizsgálatok során, és egy idő után növekednek. Összehasonlítást végeztünk, gyorsított körülmények között egy hónapig az oxidációs csúcs 0,3% fölé nőhet kontroll nélkül.

Zsírsavoldó termékek
A szomatosztatin zsírsav-oldallánca (oktadekándisav) egy linkeren keresztül kapcsolódik a lizinhez, és ez a módosulás a szintézis vagy a tárolás során részben leválhat. Még problematikusabb, hogy a váladékozás különböző helyeken történhet - a zsírsav és a linker között, valamint a linker és a peptid - között, ami különböző szennyeződéseket eredményez. Számos zsírsavakkal kapcsolatos szennyeződést{4}}szintetizáltunk ügyfeleink számára, a teljes kiürítéstől a kis részig.

PEG-lánc{0}}kapcsolódó szennyeződések
Ez a szomatosztatin szennyeződésének legspecifikusabb típusa. PEG (polietilénglikol) linkerrel rendelkezik, és a PEG lánc megszakadhat, megrövidülhet vagy polimerizálódhat a szintézis során, ami egy sor kapcsolódó szennyeződést eredményezhet. Ezek a szennyeződések nem találhatók meg a közönséges peptidekben, de csak a szomatosztatinra jellemzőek, és minőségi vizsgálatok során nehéz tanulmányozni őket. Különféle változatokat készítettünk a PEG-lánc delécióról, a PEG-láncrövidítésről és a PEG-lánc-oxidációról.

Dimerek/polimerek
Két vagy több szomatosztatin molekula csoportosul össze, és dimert vagy magasabb dimert alkot. A dimer molekulatömege kétszerese a főcsúcsának, és HPLC-n gyakran széles csúcs, ezért speciálisan el kell különíteni és meg kell tisztítani, mielőtt kontrollként használható. Elvégeztük a dimerek előkészítését, és több tisztítási körbe is telt, hogy elérjük a 95%-nál nagyobb tisztaságot.

Dezamidált szennyeződések
Az aszparagin (Asn) és a glutamin (Gln) savas vagy melegítési körülmények között könnyen dezaminálható, izomereket eredményezve. A szomatosztatin szekvenciájában több Asn és Gln található, és a dezamidációs szennyeződés gyakran megjelenik a kényszerített lebontási tesztben, ezért a szennyeződés lokalizálásához a kontrollterméket kell használni.

Diasztereoizomerek
A hosszú láncú szintézis során az egyes aminosavak racemizálódhatnak, ami diasztereoizomereket eredményez. Az ilyen típusú szennyeződések tartalma általában nem magas, de a szakértők megkérdezik a bejelentéskor, és jobb, ha van egy kontroll termék a megerősítéshez.

Ezen szennyeződések közül sok nem megvásárolható, és egyedi szintetizálásra van szükség. Számos projektet végeztünk már a szomatosztatin szennyeződések testreszabásával kapcsolatban, lefedve az összes fenti kategóriát.

A peptid sorozat törlése
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, MS és NMR megerősítéssel. Szintetizáltunk egy peptidkészletet, amelyek 5 aminosav távolságra vannak az N-terminálistól a C--terminálisig.

Oxidáló szennyeződések
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95%, és meg tudjuk adni az LC-MS spektrumot az oxidáció mértékének megerősítésére. A szulfoxidot és a szulfont HPLC választja el, és mindkettőt megtehetjük.

Zsírsavoldó termékek
Ez a Somalutide szennyeződések fő fókusza. A zsírsavlánc teljesen vagy részben elmozdulhat. Szintetizálhatunk egy sor változatot a vedlés különböző pozícióihoz. Az egyik legbonyolultabb projektünkben, amit valaha csináltunk, az ügyfél arra kért minket, hogy szintetizáljunk egy 6 szénatomot tartalmazó szennyeződést, amely hiányzik a zsírsavláncból, és két hónapba telt, mire rendbe hoztuk.

PEG-lánc{0}}kapcsolódó szennyeződések
Ez a szomatosztatin egyik legnehezebb szennyeződése, és ez az erősségünk is. A PEG-lánc hiányozhat, lerövidülhet, megszakadhat, oxidálódott, és különféle változatok keletkezhetnek. A PEG-láncot teljesen hiányzó szennyeződést (azaz de-PEGilált szomatosztatint), a PEG-lánchosszúságot felére csökkentett változatot, a PEG-láncot tartalmazó terméket oxidáltuk. Az ügyfél megkapta ezeket a vezérlőket, és a PEG{6}}szennyeződés spektruma teljesen kialakult.

Dimer
A térhálósítással vagy nem-kovalens kölcsönhatásokkal létrejövő dimerek különböző módszerekkel állíthatók elő, izolálhatók és tisztíthatók a nagy tisztaságú kontrollok biztosítása érdekében. A dimerek tisztítása fáradságos, de van tapasztalatunk a monomerek elválasztására.

Dezamidált szennyeződések
A szekvenciában lévő Asn és Gln helyekre dezaminált szennyezőkontrollokat készíthetünk kényszerlebontással vagy célzott szintézissel. A dezaminálás után a molekulatömeg különbsége mindössze 1, amit MS-vel nem könnyű megkülönböztetni, ezért általában NMR-t vagy speciális kromatográfiás körülményeket alkalmazunk a megerősítéshez.

Dther testreszabott szennyeződések
Ha új, ismeretlen szennyeződést talál a kutatása során, segítünk a szerkezet elemzésében és szintetizálásában. Küldje el nekünk a mintát, mi elvégezzük az LC-MS elemzést, kitaláljuk a szerkezetet, majd az irányított szintézist, majd összehasonlítjuk a retenciós időt és a tömegspektrumot az egyetértés megerősítéséhez. Sokszor megtettük ezt a folyamatot, és a siker aránya meglehetősen magas.

Analitikai módszerek fejlesztése és validálása
HPLC- vagy LC-MS-módszer beállításakor szennyeződés-ellenőrzés szükséges a lokalizációhoz, az elválasztás meghatározásához, a lineáris tartomány ellenőrzéséhez és a visszanyeréshez. A vezérlés nélkül a metódus érvényesítéséből hiányzik egy darab. Sok vásárló azt kéri tőlünk, hogy először végezzünk néhány kulcsfontosságú szennyeződést a módszer beállításához, majd lassan pótoljuk a többit.

Heterogén tömegspektrometria
Amikor egy generikus gyógyszert bejelentenek, átfogó minőségi és mennyiségi elemzésre van szükség a folyamatban lévő szennyeződések és bomlástermékek tekintetében. Az egyes szennyeződések elhelyezkedését, tartalmát és szerkezetét ellenőrzési termékkel kell megerősíteni. Láttuk, hogy a nyilatkozatot az információ küldték pótolni, tízből kilencszer a szennyeződéseket ez a darab nem értette.

Stabilitási tanulmányok
A hosszú távú stabilitási és gyorsított teszteknél meg kell határozni, hogy mely bomlástermékek a dominánsak, és mi a tartalom trendje. A szennyeződés-ellenőrzés segítségével pontos mennyiségi meghatározás és monitorozás lehetséges. Egy ügyfél a szomatosztatin-készítmény stabilitását vizsgálta, és azt tapasztalta, hogy a lebomlási csúcs gyorsan nőtt gyorsított körülmények között, ezért MS-vel elemeztük és szintetizáltuk, hogy megerősítsük a szerkezetet, majd az ügyfél megkönnyebbülést érzett, amikor jelenteni tudta.

A kötegelt kiadás tesztelése
A kereskedelmi forgalomba hozatalt követően minden hatóanyag-tételt vagy készítményt meg kell vizsgálni a kérdéses anyag szempontjából. A szennyeződés-ellenőrzés elengedhetetlen eszköze a kibocsátási tesztelésnek.

Tájékoztatás a generikus gyógyszerekről szóló nyilatkozatokról
A szennyezettségi vizsgálatok a bejelentési információk kulcsfontosságú részét képezik. A teljes szennyezőprofil- és ellenőrzési adatok megadása jelentősen csökkenti a felülvizsgálati kiadás kockázatát.

1. eset: Gyógyszeripari cég, Somalutide generikus gyógyszerprogram
A szomatosztatin általános változatát fejlesztik, és a módszer validálásához teljes szennyeződés-ellenőrző készletre van szükségük. 15 szennyeződést szabtunk rájuk: 6 hiányzó peptidet, 2 oxidált szennyeződést, 1 dimert, 2 zsírsavas hámlasztó terméket, 3 PEG lánchoz kapcsolódó szennyeződést és 1 deamidációs szennyeződést. Az MS és NMR adatok alapján mindegyik tisztasága 95% feletti volt. A projektmenedzser elmondta: "A Somalutide szennyeződései bonyolultabbak, mint más peptidek, különösen a PEG, amelyet már számos cég keresett, de mind azt mondták, hogy nem tudták megtenni. De mindent meg tudtál csinálni, és az adatok teljesek voltak, ami nagy segítség volt." Ezt követően módszerük validálása sikeresen lezárult, most készülnek a bejelentésre.

2. eset: CRO, speciális tanulmány a PEG-lánc szennyeződéseiről
Minőségi kutatási projektet végeztek a szomatosztatinnal kapcsolatban, amihez a PEG-lánchoz kapcsolódó szennyeződések átfogó elemzésére volt szükség. Szisztematikusan szintetizáltuk a PEG-hez{1}} kapcsolódó szennyeződéseket: a PEG-lánc teljes hiánya, a PEG-lánc hosszának felezése, a PEG-láncvégek oxidációja és a PEG-lánc két részre törése. összesen 8 PEG-kapcsolódó szennyeződést szintetizált. Az ügyfél ezeket a vezérlőket használta a PEG szennyeződés-észlelési módszer teljes készletének létrehozására, amely a bejelentési információk kiemelt elemévé vált.

3. eset: Stabilitási tanulmányok, biotechnológiai vállalat
Stabilitási vizsgálatot végeztek a szomatosztatin készítményről, és azt találták, hogy egy bomlástermék tartalma gyorsan nőtt gyorsított körülmények között, de nem tudták, mi az. A mintát LC-MS-sel elemeztük, feltételeztük, hogy egy bizonyos helyen zsírsavat ürítő szennyeződésről van szó, majd célzottan szintetizáltuk és összehasonlítással megerősítettük. Ezzel a kontrollal egy assay-t hoztak létre, és pontosan nyomon követték ennek a bomlásterméknek a tendenciáját. Később a jelentés benyújtásakor ezt az adatrészt hangsúlyozták a szakemberek, és a szilárd adatok miatt kártérítés nem történt.

A szomatosztatin rendkívül népszerű termék, de a szennyeződések vizsgálata kényes munka, különösen a PEG-lánchoz kapcsolódó szennyeződések és zsírsav-hámlasztó termékek, amelyeket sok gyártó nem tud kezelni. Ha minőségi kutatást vagy szomatosztatin generikus fejlesztést végez, és szennyeződés-ellenőrzésre van szüksége, üdvözöljük, beszéljen velünk. Rengeteg munkát végeztünk, tudjuk, mik a nehézségek, és tudjuk, hogyan oldjuk meg.