Tirzepatid szennyeződések

Tirzepatid szennyeződések|Tilpeptid szennyeződéskontroll|Szennyeződés egyedi szintézis és szerkezet megerősítése|Tudomány-Peptid

Tirzepatid szennyeződés-ellenőrzés - a GLP-1/GIP kettős-célzott gyógyszerminőség-kutatáshoz, általános gyógyszerjelentésekhez.Science-A peptid a tilpeptiddel kapcsolatos szennyeződések egyedi szintézisét biztosítja, beleértve a deléciós peptideket, oxidált szennyeződéseket, zsírsavakat, hámlasztási adatokat stb. spektroszkópiai vizsgálat szerkezeti megerősítő adatokkal. Üdvözöljük, lépjen velünk kapcsolatba.

A Tirzepatide (Tirzepatide) a GLP-1/GIP kettős agonista, amelyet Eli Lilly talált ki, és ez a két év javában zajlik. Jó cukor- és erős súlycsökkentő hatása van, és a "fogyás csodaszerének" továbbfejlesztett változatának nevezik. A hazai gyártók a peptid generikus gyógyszereket, sokan bámulják – a szabadalom lejárta után ki futhatja át először a kutatás minőségét, kinek lesz lehetősége megragadni az első generikust.

 

A tilpeptid minőségét azonban nem olyan könnyű tanulmányozni. Összetettebb, mint a szimetikon, 39 aminosavból, zsírsav-oldalláncból (eikozándisav) és linkerből áll. A szintézis során előforduló szennyeződések jóval magasabbak, mint a közönséges peptideké. A hiányzó peptidek, az oxidatív szennyeződések, a zsírsav-leválasztó termékek, a dimerek, a linkerrel kapcsolatos szennyeződések mindegyikét szabályozni kell, és mindegyiknek tisztának kell lennie.

 

Komplex peptid szennyeződések szintézisében sok tapasztalatot halmoztunk fel. A tilpeptid tanulmányozására szakosodtunk, és tudjuk, hogy milyen nehézségeket okoz a szennyeződési profilja, és melyek a lényeges kontrollelemek. A különböző tilpeptid szennyeződés-ellenőrzések szintézisét az Ön igényei szerint testre szabhatjuk szerkezet-megerősítő adatokkal, és segítünk a módszer kialakításában, hogy a bejelentéskor kisebb eséllyel kapjon kiegészítést.

A tilpeptid molekuláris szerkezete határozza meg, hogy szennyeződési profilja sokkal összetettebb, mint az általános peptideké. Amikor szennyeződésvizsgálatokat végzünk, elsősorban az alábbi kategóriákra koncentrálunk:

Hiányzó peptid
A 39 aminosav, amelyek közül bármelyik kimarad a szintézis során, szennyeződés. A hiányzó peptidek retenciós ideje HPLC-n széles körben eloszlott, a hiányzó peptidek eltérő polaritással a különböző pozíciókban. Némelyik hiányzik az N-végről, néhány a közepén, néhány pedig a zsírsav-csatlakozási hely közelében. Megrendelést kaptunk egy vásárlótól 15 különböző pozícióban lévő hiányzó peptidre, hogy lokalizáljuk az összes lehetséges hiányzó szennyeződést a folyamat során.

Oxidáló szennyeződések
A tilpeptid szekvenciájában lévő Met érzékeny szulfoxiddá, majd szulfonná történő oxidációra. Az oxidált szennyeződések gyakran megjelennek a stabilitási vizsgálatok során, és egy idő után növekednek. Összehasonlítást végeztünk, gyorsított körülmények között egy hónapig az oxidációs csúcs 0,3% fölé nőhet kontroll nélkül.

Zsírsavoldó termékek
Ez a tilpeptid egyedi szennyeződése. Zsírsav-oldallánca (eikozándisav) egy linkeren keresztül kapcsolódik a lizinhez, és ez a módosulás a szintézis vagy a tárolás során részben leválhat, aminek eredményeként a zsírsav-eltávolítja a szennyeződéseket. Még problémásabb, hogy a váladékozás különböző helyeken történhet - a zsírsav és a linker között, vagy a linker és a peptid - között, ami különböző szennyeződéseket eredményez. Számos zsírsavakkal kapcsolatos szennyeződést{6}}szintetizáltunk ügyfeleink számára, a teljes kiürítéstől a kis részig.

Dimerek/polimerek
Két vagy több tilpeptid molekula csoportosul össze, és dimert vagy magasabb dimert alkot. A dimer molekulatömege kétszerese a főcsúcsának, és HPLC-n gyakran széles csúcs, ezért speciálisan el kell különíteni és meg kell tisztítani, mielőtt kontrollként használható. Elvégeztük a dimerek előkészítését, és több tisztítási körbe is telt, hogy elérjük a 95%-nál nagyobb tisztaságot.

Linker{0}}kapcsolódó szennyeződések
A tilpeptid zsírsav-módosítása linkert használ (pl. -Glu, PEG stb.), és ez a linker maga is mellékreakciókat válthat ki a szintézis során, szennyeződéseket generálva hiányzó vagy hiányos linkerekkel. Ez a fajta szennyeződés nem található meg a közönséges peptidekben, de csak a tilpeptidre jellemző, amelyet speciálisan kell tanulmányozni.

Dezamidált szennyeződések
Az aszparagin (Asn) és a glutamin (Gln) savas vagy melegítési körülmények között könnyen dezaminálható, izomereket eredményezve. A tilpeptid szekvenciájában több Asn és Gln is található, és a dezamidációs szennyeződés gyakran megjelenik a kényszerített lebontási tesztben, ezért a kontrollterméket kell használni a szennyeződés lokalizálásához.

Diasztereoizomerek
A hosszú láncú szintézis során az egyes aminosavak racemizálódhatnak, ami diasztereoizomereket eredményez. Az ilyen típusú szennyeződések tartalma általában nem magas, de a szakértők megkérdezik a bejelentéskor, és jobb, ha van egy kontroll termék a megerősítéshez.

Ezen szennyeződések közül sok nem megvásárolható, és egyedi szintetizálásra van szükség. Rengeteg projektet végeztünk a tilpeptid szennyeződések testreszabásával kapcsolatban, lefedve a fenti kategóriákat.

A peptid sorozat törlése
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, MS és NMR megerősítéssel. Szintetizáltunk egy peptidkészletet, amelyek 5 aminosav távolságra vannak az N-terminálistól a C--terminálisig.

Oxidáló szennyeződések
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95%, és meg tudjuk adni az LC-MS spektrumot az oxidáció mértékének megerősítésére. A szulfoxidot és a szulfont HPLC választja el, és mindkettőt megtehetjük.

Zsírsavoldó termékek
Ez az egyik legnehezebben feldolgozható szennyeződés a tilpeptidben. Lehet, hogy a zsírsavlánc teljesen, vagy részlegesen (pl. az utolsó néhány szénatom hiányzik). A lánc különböző pozícióihoz egy sor változatot szintetizálhatunk. Az egyik legbonyolultabb projektünkben a megrendelő arra kért minket, hogy szintetizáljunk egy 8 szénatomos szennyeződést, amely hiányzik a zsírsavláncból, és két hónapba telt, mire rendbe hoztuk.

Dimer
A térhálósítással vagy nem-kovalens kölcsönhatásokkal létrejövő dimerek különböző módszerekkel állíthatók elő, majd izolálhatók és tisztíthatók a nagy tisztaságú kontrollok biztosítása érdekében. A dimerek tisztítása fáradságos, de van tapasztalatunk a monomerek elválasztására.

Linker{0}}kapcsolódó szennyeződések
A linker (-Glu, PEG stb.) hiányozhat vagy hiányos, ami egy sor kapcsolódó szennyeződést eredményezhet. Különféle változatokat szintetizálhatunk hiányzó linkerekkel, rövidített linkerekkel vagy nem illő linkerekkel, és segítünk az ilyen szennyeződések spektrumának felépítésében.

Dezamidált szennyeződések
A szekvenciában lévő Asn és Gln helyekre dezaminált szennyezőkontrollokat készíthetünk kényszerlebontással vagy célzott szintézissel. A dezaminálás utáni molekulatömeg-különbség mindössze 1, amit MS-vel nem könnyű megkülönböztetni, ezért a megerősítéshez általában NMR-t vagy speciális kromatográfiás körülményeket alkalmazunk.

Egyéb egyedi szennyeződések
Ha új, ismeretlen szennyeződést talál a kutatása során, segítünk a szerkezet elemzésében és szintetizálásában. Küldje el nekünk a mintákat, mi elvégezzük az LC-MS elemzést, kikövetkeztetjük a szerkezetet, majd az irányított szintézist, majd összehasonlítjuk a retenciós időt és a tömegspektrumot az egyetértés megerősítése érdekében. Sokszor megtettük ezt a folyamatot, és a siker aránya meglehetősen magas.

Analitikai módszerek fejlesztése és validálása
HPLC vagy LC-MS módszer beállításakor szennyeződés-ellenőrzés szükséges a lokalizációhoz, az elválasztás meghatározásához, a lineáris tartomány ellenőrzéséhez és a visszanyeréshez. A vezérlés nélkül a metódus érvényesítéséből hiányzik egy darab. Sok vásárló azt kéri tőlünk, hogy először végezzünk néhány kulcsfontosságú szennyeződést a módszer beállításához, majd lassan pótoljuk a többit.

Heterogén tömegspektrometria
Amikor egy generikus gyógyszert bejelentenek, átfogó minőségi és mennyiségi elemzésre van szükség a folyamatban lévő szennyeződések és bomlástermékek tekintetében. Az egyes szennyeződések elhelyezkedését, tartalmát és szerkezetét ellenőrzési termékkel kell megerősíteni. Láttuk a nyilatkozatot az információk kitöltésére küldték el, tízből kilencszer a szennyeződéseket ez a darab nem értette.

Stabilitási tanulmányok
A hosszú távú stabilitási és gyorsított teszteknél meg kell határozni, hogy mely bomlástermékek a dominánsak, és mi a tartalom trendje. A szennyeződés-ellenőrzés segítségével pontosan tudjuk számszerűsíteni és ellenőrizni. Egy ügyfél a tilpeptid készítmény stabilitásának vizsgálatát végezte, és azt tapasztalta, hogy egy lebomlási csúcs nagyon gyorsan nőtt gyorsított körülmények között, ezért elemeztük és szintetizáltuk az MS-vel, hogy megerősítsük a szerkezetet, majd az ügyfél megkönnyebbülten jelentette be.

A kötegelt kiadás tesztelése
A kereskedelmi forgalomba hozatalt követően minden hatóanyag-tételt vagy készítményt meg kell vizsgálni a kérdéses anyag szempontjából. A szennyeződés-ellenőrzés elengedhetetlen eszköze a kibocsátási tesztelésnek.

Tájékoztatás a generikus gyógyszerekről szóló nyilatkozatokról
A szennyezettségi vizsgálatok a bejelentési információk kulcsfontosságú részét képezik. A teljes szennyezőprofil- és ellenőrzési adatok megadása jelentősen csökkenti a felülvizsgálati kiadás kockázatát.

1. eset: gyógyszeripari cég, tilpeptid generikus gyógyszerprogram
A tilpeptid általános változatát fejlesztik, és a módszer validálásához szükségük van egy teljes szennyeződés-ellenőrző készletre. 12 szennyeződést állítottunk be számukra: 5 hiányzó peptidet, 2 oxidált szennyeződést, 1 dimert, 2 zsírsav-eltávolító terméket és 2 linkerrel kapcsolatos szennyeződést. Mindegyikük több mint 95%-os tisztaságú, és MS és NMR adatok kísérik. A projekt vezetője azt mondta: "A tilpeptidben kétszer annyi szennyeződés van, mint más peptidekben, de mindegyiket elkészítheti, és az adatok teljesek, ami sok munkát takarít meg." Később sikeresen lezárult a módszerük érvényesítése, most készülnek a bevallásra.

2. eset: CRO cég, szennyeződés-profilozás
Minőségi kutatási projektet végeztek a tilpeptiddel kapcsolatban, amihez a folyamatban lévő szennyeződések átfogó elemzésére volt szükség. Elküldték nekünk a nyers peptid mintákat, és elvégeztük az LC-MS analízist, kikövetkeztettük több ismeretlen szennyeződés lehetséges szerkezetét, majd célzottan szintetizáltuk őket, és összehasonlítottuk a retenciós időket és a tömegspektrumokat, és megerősítettük négy új szennyeződést - kettő linker-rokonság, kettő közülük pedig zsírsav-variáns. Az ügyfél ezeket az adatokat használta a szennyeződési profilok finomításához, és sikeresen átadta az ügyfél elfogadását.

3. eset: Stabilitási tanulmányok, biotechnológiai vállalat
Egy tilpeptid készítmény stabilitását vizsgálták, és azt találták, hogy a bomlástermék mennyisége gyorsan nőtt gyorsított körülmények között, de nem tudták, mi az. A mintát LC-MS-sel elemeztük, és feltételeztük, hogy egy bizonyos Asn helyen dezaminációs szennyeződésről van szó, majd célzottan szintetizáltuk, és összehasonlítással megerősítettük. Ezzel a kontrollal létrehoztak egy tesztet, és pontosan követték a bomlástermék trendjét. Később a jelentés benyújtásakor az adatok ezen részét kiemelték a szakemberek, és a szilárd adatok miatt kártérítést nem adtak ki.

A tilpeptid népszerű termék, de a szennyeződések vizsgálata kényes munka, különösen a zsírsavas hámlasztó termékek és a linker{0}}szennyeződések, amelyeket sok gyártó nem tud kezelni. Ha minőségi kutatást vagy általános fejlesztést végez a tilpeptiddel kapcsolatban, és szennyeződés-ellenőrzésre van szüksége, kérjük, forduljon hozzánk bizalommal. Rengeteg munkát végeztünk, tudjuk, mik a nehézségek, és tudjuk, hogyan oldjuk meg.